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ELISA Reasgents

產品介紹:

 

BioTNT 推出升級版ELISA包被經濟套餐3(5塊板),方便客戶進行ELISA 的包被實驗??捎糜誚諼窗籈LISA 抗體對進行包被實驗的配套使用, 品質優良, 完全可以替代原裝進口產品。也可用于實驗室自己進行ELISA的構建研究。經測試,比原試劑盒提供的緩沖液配方可以顯著提高試劑盒的靈敏度,降低試劑盒的檢測下限,可以達到良好的穩定性;并顯著降低試劑盒的本底;

 

實驗流程:

 

 

實驗數據:

Human TRANCE/RANK L/TNFSF11 Catalog Number: DY626)為例:

以RND duoset 為例,試劑盒示例數據 VS BioTNT包被經濟套餐3+RND duoset

 

 

檢測下限(pg/ml)(更低的檢測下限代表試劑盒靈敏度更高,性能更好):

價格對比(5塊板):

 

 

 

 

訂購信息:

EL-CPX-5,ELISA包被經濟套餐3(5塊板), 可用于5塊板ELISA 包被;可適用于RND duoset 5塊板的配套包被使用;適用于anogen 5塊板的配套包被使用;適用于adipogen 5塊板的配套包被使用;

EL-CPX-10,ELISA包被經濟套餐3(10塊板),可用于10塊板ELISA 包被,可適用于anogen 10塊板的配套包被使用;可適用于antigenix 10塊板的配套包被使用;

EL-CPX-15, ELISA包被經濟套餐3(15塊板),可以用于15塊板ELISA 包被,可適用于RND duoset 15塊板的配套包被使用;

 

產品包裝如下:

 

產品編號

產品名稱

EL-CPX-5

EL-CPX-10

EL-CPX-15

EL-CPX01

coating buffer 包被緩沖液

15ml(10X)

30ml(10X)

50 ml (10X

EL-CPX02

Nunc 單條可拆酶標板maxisorp

5個/包

10個/包

15個/包

EL-CPX03

酶標板穩定劑

100ml(即用型)

200ml(即用型)

300ml(即用型)

EL-CPX08

標準品稀釋液和血清樣品稀釋液

50ml

50ml

50ml

EL-CPX04

生物素(Biotin)稀釋液

25ml

50ml

75ml

EL-CPX05

HRP耦聯物?;ぜ?穩定稀釋液

50ml

100ml

150ml

EL-CPX06

顯色液A,B(Substrate   A,B)

30ml(各1瓶)

60ml(各1瓶)

100(各1瓶)

EL-CPX07

終止液(Stop Solution)

50ml(即用型)

100ml(即用型)

150ml(即用型)

 

 使用舉例:

Human TRANCE/RANK L/TNFSF11 Catalog Number: DY626)為例:

如果客戶購買RND systems的duoset 未包被ELISA kit,試劑盒提供:CaptureAntibody (1 vial) ,Detection Antibody (1 vial) ,Standard,Streptavidin-HRP (1 vial);  

BioTNT 提供的ELISA包被經濟套裝3  EL-CPX提供了包被需要的絕大多數試劑;經測試,比原試劑盒提供的緩沖液配方可以顯著提高試劑盒的靈敏度,結合凍干工藝,可以達到良好的穩定性;并顯著降低試劑盒的本底;

 

成分貨號

內容

BioTNT 包被產品特點

R公司產品

 DY008產品成分

EL-CPX01

coating buffer 包被緩沖液

經典配方,適用于雙抗夾心法的一抗包被;

137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 8.1 mM Na2HPO4, 1.5 mM KH2PO4, pH   7.2-7.4, 0.2 μm filtered (R&D Systems®, Catalog # DY006).

EL-CPX02

Nunc 單條可拆酶標板maxisorp

提供高靈敏nunc 酶標板(maxisorp),單孔可拆,靈敏度高;

DY990,96孔板

EL-CPX03

酶標板穩定劑

可與國外原裝酶標板穩定劑相媲美,上百次實驗驗證;可以集blocking和酶標板穩定于一步。

Biotnt 提供的酶標板穩定劑可以給您兩方面的幫助:

1. 封閉非特異性和未結合的位點,減少實驗背景;

2.穩定被固定的生物分子,改善測試試劑盒的貨架壽命;

Reagent Diluent: 1% BSA in PBS, pH   7.2-7.4, 0.2 μm filtered (R&D Systems®, Catalog # DY995)

EL-CPX08

標準品稀釋液和血清樣品稀釋液

biotnt提供的樣品稀釋液同時可用于標準品的稀釋,可以降低零孔的本底; 用PBS 來代替時,本底會升高;

采用Reagent Diluent,配方同上。與血清并不類似

EL-CPX04

生物素(Biotin)稀釋液

可穩定保存biotin 抗體,用PBS 來代替時,biotin 溶液不夠穩定;

采用Reagent Diluent,配方同上。沒有穩定作用

EL-CPX05

HRP耦聯物?;ぜ?穩定稀釋液

1.     HRP耦聯物?;ぜ?穩定稀釋液產品特點:

  提高信燥比:可提高免疫實驗的敏感度,降低背景;

  提高了實驗的可重復性;

Biotnt提供的HRP耦聯物?;ぜ?,可把幾萬倍的HRP濃縮液用HRP耦聯物?;ぜ?/span>/穩定稀釋液稀釋至100×或者20×,并在4度穩定保存半年,可稀釋HRP濃縮液為即用型,方便日常實驗的使用。

2.   采用Reagent Diluent,配方同上。 PBS 或者reagent diluent來代替時,穩定性不好,本底升高,實驗的靈敏度降低;

EL-CPX06

顯色液A,B(Substrate A,B)

優點:

1.穩定性好:室溫儲存12個月;2-8度至少24個月;

2.安全性好:不含有害溶劑,如DMF或者DMSO;

3.雙組分, 靈敏度極高;

4.批間差小,背景低,效率高;

TMB A, B (R&D Systems®,   Catalog # DY999)

EL-CPX07

終止液(Stop Solution)

經典終止液配方2 N H2SO4

2 N H2SO4 (R&D Systems®, Catalog # DY994)

 

可以BIOTNT ELISA 輔助試劑中找到其他ELISA 需要使用到的產品:

品名

貨號

品牌

規格

用途

封板膜(plate sealer)

EL-CPI05-01

BioTNT

1大張

可以剪裁后用于板的密封

酶標板自封鋁箔袋+干燥劑

EL-CPI05-20

BioTNT

20個自封袋+40個干燥劑

包被板的密封,干燥,穩定

樣品稀釋液:非血清樣品

EL-CPV03-100

BioTNT

100ml

用來稀釋細胞上清樣品或其他非血清樣品

ELISA 洗滌液(20X)

EL-00402-250

BioTNT

250ml

包被過程和實驗過程中用于洗板;如果對實驗要求不高,可以用PBS(EL-00402)代替;

PBS (緩沖液干粉

P1010-2L

BioTNT

2L

可用來配制2L PBS 的干粉

 更多產品見ELISA reagents  產品目錄;//www.jxfkv.icu/product/ELISA-Reagents.aspx

 

 

品名 貨號 特性 品牌 規格 價格
PBS緩沖液干粉 P1010-2L BioTNT 2L ¥10
¥8
ELISA包被經濟套餐3(5塊板) EL-CPX-5 BioTNT 可用于5塊板的包被 ¥980
¥750
ELISA包被經濟套餐3(15塊板) EL-CPX-15 BioTNT 可用于15塊板的包被 ¥2070
¥1590
ELISA包被經濟套餐3 (10塊板) EL-CPX-10 BioTNT 可用于10塊板的包被 ¥1460
¥1125
酶標板穩定劑 EL-CPX03-500 BioTNT 500ml(即用型) ¥910
¥700
酶標板穩定劑 EL-CPX03-250 BioTNT 250ml(即用型) ¥520
¥400
酶標板穩定劑 EL-CPX03-125 BioTNT 125ml(即用型) ¥320
¥250
Nunc?單條可拆酶標板maxisorp EL-CPX02-60 BioTNT 60個/箱 ¥1560
¥1200
coating buffer?包被緩沖液(10X) EL-CPX01-250 BioTNT 250ml(10X) ¥460
¥350
coating buffer?包被緩沖液(10X) EL-CPX01-125 BioTNT 125ml(10X) ¥260
¥200
HRP耦聯物?;ぜ?穩定稀釋液 EL-CPV05-500 BioTNT 500ml ¥1560
¥1200
HRP耦聯物?;ぜ?穩定稀釋液 EL-CPV05-250 BioTNT 250ml ¥910
¥700
HRP耦聯物?;ぜ?穩定稀釋液 EL-CPV05-125 BioTNT 125ml ¥520
¥400
HRP耦聯物?;ぜ?穩定稀釋液 EL-CPV05 BioTNT 50ml ¥280
¥212
生物素(Biotin)稀釋液 EL-CPV04-50 BioTNT 50ml ¥390
¥300
生物素(Biotin)稀釋液 EL-CPV04-250 BioTNT 250ml ¥1300
¥1000
生物素(Biotin)稀釋液 EL-CPV04-25 BioTNT 25ml ¥260
¥200
生物素(Biotin)稀釋液 EL-CPV04-125 BioTNT 125ml ¥780
¥600
樣品稀釋液:用來稀釋細胞上清樣品或其他非血清樣品 EL-CPV03-500 BioTNT 500ml ¥460
¥350
樣品稀釋液:用來稀釋細胞上清樣品或其他非血清樣品 EL-CPV03-250 BioTNT 250ml ¥260
¥200
樣品稀釋液:用來稀釋細胞上清樣品或其他非血清樣品 EL-CPV03-1000 BioTNT 500mlx2 ¥840
¥650
樣品稀釋液:用來稀釋細胞上清樣品或其他非血清樣品 EL-CPV03-100 BioTNT 100ml ¥120
¥90
樣品稀釋液:直接用來稀釋血清樣品 EL-CPV02-500 BioTNT 500ml ¥460
¥350
樣品稀釋液:直接用來稀釋血清樣品 EL-CPV02-250 BioTNT 250ml ¥260
¥200
樣品稀釋液:直接用來稀釋血清樣品 EL-CPV02-1000 BioTNT 500mlx2 ¥840
¥650
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Biotnt 提供以下標本代測服務和ELISA包被服務:


1、 預包被試劑盒的查找和代測服務:Biotnt 提供以下品牌如美國Antigenix,ADI,Biolegend,Crystal,ebioscience, monobind,pheonixpeptide,Raybiotech,Rndsystems, Zeus scentific, 德國LDN, DRG, domestic, IBL, 日本shibayaji,瑞典Mercordia, 加拿大Anogen,等國際著名ELISA品牌的試劑盒代購和實驗代測服務;更多可靠品牌可以查詢,并咨詢相應地區銷售負責人;

 

2、 BioTNT 推出RND duoset試劑盒的包被和檢測服務:

您在RND Systems 官網查詢到的duoset 試劑盒,由biotnt 代購 或者由客戶自己提供,biotnt 進行包被和代測服務,僅收取1000元/板的技術服務費,每板可以進行80個樣品的單孔檢測;

舉例:

購買:

Human Angiopoietin-2 DuoSet, 15 Plate; 貨號:DY623 ;

可進行15塊板的包被和檢測; 費用僅需:8440+15000=23440;

合計:每塊板的費用為:1563元;

優點:可以用RND 品牌發表文章,發表文章時materials:Human Angiopoietin-2 DuoSet, Biotnt construct pack I and Biotnt construct pack II;

BioTNT 技術中心多年ELISA 實驗經驗,保證您獲得可靠的實驗數據;

 

3、BioTNT 推出ebioscience ELISA Ready-SET-Go!?的包被和檢測服務;

您在ebioscience官網查詢到的ELISA Ready-SET-Go!?試劑盒,由biotnt 代購 或者由客戶自己提供,biotnt 進行包被和代測服務,單塊板收取1500/板的技術服務費,包括試劑盒的購買費用;每板可以進行80個樣品的單孔檢測;

舉例:

購買:

Human IL-10 ELISA Ready-SET-Go!?; 貨號:88-7106 ;

每塊板的費用僅需要1500元;

優點:可以用ebiosceince 品牌發表文章,發表文章時materials:Human IL-10 ELISA Ready-SET-Go!?; 貨號:88-7106 ;Biotnt construct pack I and Biotnt construct pack II;

BioTNT 技術中心多年ELISA 實驗經驗,保證您獲得可靠的實驗數據;

 

4、BioTNT 推出antigenix ELISA construction kit的包被和檢測服務;

您在antigenix官網查詢到的ELISA construction kit 試劑盒,由biotnt 代購 或者由客戶自己提供,biotnt 進行包被和代測服務,僅收取1000元/板的技術服務費,每板可以進行80個樣品的單孔檢測;

舉例:

購買:

Mouse IL 1 Beta Construction Kit; 貨號:RMF120CK ;

可進行10塊板的包被和檢測; 費用僅需:6500+10000=16500;

合計:每塊板的費用為:1650元;

優點:可以用antigenix 品牌發表文章,發表文章時materials:Mouse IL 1 Beta Construction Kit; 貨號:RMF120CK ;Biotnt construct pack I and Biotnt construct pack II;

BioTNT 技術中心多年ELISA 實驗經驗,保證您獲得可靠的實驗數據;

 

5、BioTNT 推出Biolegend ELISA 未包被板的包被和檢測服務;

您在biolegend 官網查詢到的ELISA construction kit 試劑盒,由biotnt 代購 或者由客戶自己提供,biotnt 進行包被和代測服務,僅收取1000元/板的技術服務費,每板可以進行80個樣品的單孔檢測;

舉例:

購買:human IFN gamma ELISA 5塊板,未包被包裝;

可進行5 塊板的包被和檢測; 費用僅需:4000+5000=9000;

合計:每塊板的費用為:1800元;

優點:可以用Biolegend 品牌發表文章,發表文章時materials:human IFN gamma ELISA ;Biotnt construct pack I and Biotnt construct pack II;

BioTNT 技術中心多年ELISA 實驗經驗,保證您獲得可靠的實驗數據;

 

以上所有檢測服務,如果不需要,僅需要提供包被服務,價格相同;包被板可以穩定6個月(包被質量依賴于capture 抗體的質量)

 

6、 Biotnt 同時提供可與原裝進口媲美的ELISA Construction Pack, 方便客戶進行ELISA 實驗;

7、Biotnt 提供更多的ELISA developing 試劑,方便您進行ELISA的科研和生產;

8、Biotnt 提供抗體選擇咨詢:依據多年的ELISA實驗經驗和嚴禁的實驗態度,Biotnt 愿與您探討ELISA抗體的選擇和購買;

9、 對于客戶提供的一抗和二抗,標準品進行試劑盒研發,收取3000元/每個項目的研發費用;

10、 ELISA 輔助服務:如果客戶提供的是固體樣本,如組織或細胞,需要Biotnt 進行組織勻漿或細胞裂解,提蛋白,以及蛋白定量;這一步需要收取費用;


ELISA 樣本:

    建議客戶提供液體標本進行ELISA檢測,如血清,抗凝血漿,細胞上清,其他生物學體液;如客戶的樣本為組織或者細胞等非液體樣本,需要進行樣本的預處理;客戶可以自己對樣本進行預處理,如組織的勻漿,然后測定蛋白含量;細胞樣本進行細胞裂解液制備后,也需要進行蛋白定量;蛋白定量請采用Bradford 法或者BCA法進行。

 

 


注意事項及說明:

?  上述試劑均可2-8℃保存,保質期為一年;其中終止液可以室溫或低溫保存;

?  試劑如儲存時間較久,請在正式實驗前進行預實驗驗證試劑質量;

?  顯色液B液需避光保存;

?  酶標板穩定劑經0.2um過慮,含非汞防腐劑以抑制保存過程中微生物繁殖;

?  為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴防護手套操作。


試劑使用說明和包被實驗示例:

一、包被液的配制:

coating buffer 包被緩沖液(EL-CPI01):該試劑為10X 濃縮液,使用前請根據實驗用量,用蒸餾水稀釋至1X,即配即用,例:10ml coating buffer + 90ml蒸餾水;

 Coating buffer 用于抗體的包被;可替代以PBS為主的包被液體;請用1* coating  buffer和適量抗體配成包被液,抗體濃度請參考抗體的說明。


二、包被實驗示例:

ELISA酶標板(EL-CPI02中每孔加入100ul包被液(包被液若有剩余可多包被一點,以條為單位),在板上貼膜,室溫(控制室溫在25,板放置處旁放置溫度計控溫)溫育過夜(下午4點到第二天早上9點,不宜縮短時間,會降低包板效率);結束溫育(也請參考抗體說明書的包被條件進行相應調整)。多余的配好的包被液不能保存。


三、洗板封閉:

1)        洗液20×Wash BufferEL-00402(可以用PBS +Tween 20代替)配制成1×Wash Buffer(實驗前請合理計算用量,配制成足夠的量待用),用1×Wash Buffer洗板4次(注:包被組分在加穩定劑前不能劇烈震蕩或完全干燥,所以洗板過程需快速、溫和,不要拼命拍板);

2)        洗板后立即加入200ul每孔的酶標板穩定劑(EL-CPI02),37溫育1小時;

3)        棄掉或吸取酶標板穩定劑(注:拍干,千萬不要洗板)。


封閉好的酶標板可以有以下幾種處理方式。

方式一:直接進行檢測。


方式二:

1)   凍干成品:把酶標板放入冰箱,-20℃冰箱冷凍過夜。

2)   調試真空凍干機,立即將冷凍過夜的酶標板放入真空凍干機凍干24小時;

3)   取出凍干的酶標板,立即將酶標板放入一個裝有干燥劑(EL-CPI06)的鋁箔袋內(EL-CPI05),貼上標簽,放4℃冰箱長期保存。(凍干同時可進行標準品凍干)。


方式三:室溫晾干

按照以下方法晾干長期保存:

1)   室溫或者 37°C ;

2)   濕度: 最好在一個濕盒中(小于 15% 濕度);

3)    時間: 2-24 小時,晾干;確認干燥

4)   立即將將經過穩定劑處理的產品封裝在一個含有干燥劑(EL-CPI06)的密閉防潮容器中,正確使用干燥劑包裝是長期保存的關鍵。

注意:如果酶標板不直接進行檢測,必須采用方式二或者方式三,進行干燥。干燥后的酶標板才可以穩定保存。


四、檢測方法示例

(請參考抗體說明,安排相應的檢測方法,根據您的實驗路線,如果是雙抗夾心法,可以選擇酶標二抗,也可以選擇生物素二抗,采用生物素-親和素的放大系統):

實驗示例:下面是雙抗夾心法的實驗示例: 

1)        以上的酶標板已經預包被了抗體,選取相應的板條;

2)        標準品請用相應的稀釋液稀釋;如檢測的是血清,標準品用EL-CPV02稀釋;如果檢測的是細胞上清樣品或其他非血清樣品,請用EL-CPV03稀釋;

3)        酶標板中加入適量稀釋好的標準品和樣品,各100ul;

4)        37度溫育12小時;

5)        洗板四次(洗液同上);

6)        生物素二抗請根據說明書,用生物素(Biotin)稀釋液(EL-CPV04)進行稀釋;

7)        37度溫育30分鐘;

8)        洗板四次;

9)        酶標二抗,請用(EL-CPV05)稀釋;

10)     每孔加入100ul 稀釋好的酶標二抗,37度溫育1小時或其他時間;

11)     洗板四次;

12)     加入顯色液:顯色液A,BSubstrate A,B)(EL-CPI03);使用前請按按照A液和B11比例充分混勻,方可使用,使用前15分鐘配置;每孔加入50ul-100ul混合后的顯色液;室溫溫育10-30分鐘:顯色時間根據目測最高濃度標準品的顏色,應為深藍色,630讀數,OD 值應在0.7以上;

13)     加入終止液(Stop Solution)(EL-CPI04100ul 每孔。

加入終止液50ul-100ul,顯色從藍色轉為黃色。建議采用450-630的雙波讀數。

 

注:根據實驗設計不同的包被濃度,酶標二抗濃度,HRP濃度,反應時間等變量,找到最優化的實驗條件。確定試劑盒定量范圍、靈敏度等試劑盒特性。

雙抗夾心法可以回歸為線性、二次曲線,或者四參數曲線;

競爭法可以回歸為log-logit,或者四參數曲線;


ELISACAL
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